DETECCIÓN DE CRIOGLOBULINAS. 12/1/15

INTRODUCCIÓN

Las crioglobulinas son inmunoglobulinas aisladas o complejos inmunes que están alterados. Esta alteración hace que se vuelvan insolubles y precipiten en el suero cuando están expuestas a una temperatura inferior a la normal del cuerpo humano ( unos 37%).

Antes o durante el proceso de precipitación, también se puede producir una fijación de componentes del complemento a la crioglobulinas:

Se distinguen 3 clases de crioglobulinas:

• Crioglobulinas tipo I

Consisten en una inmunoglobulina monoclonal (IgG o IgM) (paraproteína).

Se encuentran en el suero a una alta concentración (> 5 mg/ml).

•Crioglobulinas tipo II

Son complejos de una inmunoglobulina monoclonal ( de clase IgM) y de otra policlonal ( generealmente de clase IgG) que funciona como antígeno (Ag).

Se hallan en el suero a una concentración mediana (1-5 mg/ml).

•Crioglobulinas tipo III

Son las que se producen más frecuentemente.

Están formadas por 2 inmunoglubilinas policlónicas ( habitualmente, una de clase IgG y otra de clase IgM).

Su concentración sérica es muy baja (< 80µg/ml).

Fundamento

La detección de crioglobulinas se basa en la exposición del suero problema a la acción de una temperatura baja (unos 4⁰C, pues ésta es la temperatura a la que las crioglobulinas precipitan más).

Si el suero problema contien crioglobulinas, éstas precipitan con el frio, y el precipitado formado adopta el aspecto de partículas blanquecinas.

Material

• Una pipeta Pateur.
• Un tubo de ensayo.
• Una gradilla.
• Una nevera.
• Un baño de agua.
• Un capilar de microhematocrito no heparinizado.
• Plastilina.
• Una centrífuga de microhematocrito.
• Una regla o un lectro de microhematocrito.

Muestra

• Suero tranparente, obtenido de sangre coagulada completamente a temperatura corporal, y separado del coágulo en un ambiente cálido.

Es importante evitar que la coagulación se produzca en un ambiente frío, pues esto puede dar lugar a la formación de una pequeña cantidad de crioglubilinas.

Técnica

1. Depositar el suero problema en un tubo de ensayo.
2. Colocar el tubo que contiene el suero problema en una nevera, de forma que esté a una temperatura comprendida entre los 4 y los 6⁰C.
3. Examinar el tubo a los 30 minutos y después cada día, durante 6 días.

Lectura de resultados

• Si aparecen partículas blanquecinas en el suero, éste ha de ser incubado a 37⁰C.

Cuando no desaparecen las partículas, tras la incubación, se considera que éstas se deben a restos de fibrina.

Sin embargo, cuando las partículas desaparecen, se estima que son crioglobulinas precipitadas (prueba positiva).

• El grado de positividad de la prueba puede ser establecido de la siguiente manera:

ASPECTO DEL SUERO GRADO DE POSITIVIDAD

Discretamente turbio +

Francamente turbio ++

Lechoso +++

En el caso de que la prueba sea positiva, puede realizarse una semicuantificación de las crioglobulinas presentes en el suero, mediante la determinación del criocrito.

Éste se mide de la siguiente manera:

1. Llenar un tubo capilar de microhematocrito con el suero problema, hasta las ¾ partes de su longitud.
2. Sellar con plastilina en el extremo del tubo por el que ha entrado el suero.
3. Enfriar el tubo a 4-6 ⁰C, hasta que se produzca la precipitación máxima de las crioglobulinas.
4. Centrifugar el tubo a unos 12.000 g durante 5 minutos.
5. Calcular el porcentaje que supone la columna de precipitado, con respecto a la columna total de suero.

El criocrito es, por lo tanto, la relación existente entre el volumen ocupado por el precipitado de crioglobulinas y el ocupado por el suero total, expresada en forma de porcentaje.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS

Las crioglobulinemias tipo I se asocian a trastornos proliferativos (mieloma múltiple, macroglobulinemia de Walsenström y leucemia linfática crónica).

Las crioglobulinemias tipo II pueden ser idiopáticas o secundarias a distintas enfermedades ( transtornos proliferativos, conectivopatías, hepatopatías crónicas, etc.).

Las crioglobulinemias tipo III suelen estar relacionadas con infecciones sistémicas y con procesos autoinmunes (glomerulonefritis, lupus eritematosos diseminado, etc.).

Las manifestaciones clínicas de las crioglonulinemais se deben a los siguientes fenómenos originados por ellas:

• Aumento de la viscosidad de la sangre

Esto puede conducir a una estasis* sanguínea en algunos vasos corporales ( por ejemplo, en los retinianos y en los conjuntivales) y contribuye a la aparición de trastornos isquémicos.

• Precipitación de las crioglobulinas

Se produce en los vasos sanguíneos más distales*, pues en éstos la temperatura normal es algo menos que en el resto del cuerpo (30-31⁰C), y es favorecida por la exposición a temperaturas ambientales bajas.

Origina una obstrucción vascular, que puede ocasionar una acrocianosis*, un fenómeno de Raynaud* e incluso una isquemia* digital con necrosis*.

• Depósito de inmunocomplejos

Puede ser causa de la aparición de daños renales ( glomerulonefritis) o articulares.

ACTIVIDADES.

1. ¿A qué temperatura se debe someter el suero en una detección de crioglobulinas? 

         A 4ºC

1. Si el precipitado no se reabsorbe con calor, ¿de qué sustancia está formado?

           particulas blanquecinas

1. ¿Cuántas cruces se le asigna a un suero que adquiere un aspecto lechoso? 

            +++

1. ¿A qué concentración sérica suelen encontrarse las crioglobulinas tipo I?

         > de 5mg/ml

1. ¿Qué manifestaciones clínicas puede producir una crioglobulinemia?

          Aumento  de la viscosidad,precipitación de las crioglobulinas y depósito de inmunocomplejos.