Tinción de Wright. 6/11/14

El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno y azul B junto con otros derivados del alcohol metílico. Dada la presencia de metanol en la composición del colorante, no es necesario un paso previo de fijación antes de la coloración.

Solo si se van a guardar las extensiones sin teñir de un dia para otro precederemos a su fijación para evitar el deterioro del frotis.

• Muestra utilizada.

Sangre anticoagulada.

• Material utilizado.

• Tubos de ensayo.
• Microscopio óptico.
• Cristalizador.
• Puentes de tinción.
• Pipetas pasteur.
• Frasco lavador.
• Guantes.

• Reactivos utilizados.

• Solición de eosina-azul de metileno según Wrigth.
• Solucion tampón pH 7.2
• aceite de inmersión.

• Secuenciación y procedimiento seguido.

1. Realizar un frotis sanguíneo muy fino y dejar secar al aire.

2. Sobre la extensión colocada horizontalmente en el puente de tinción verter 1ml de eosina-azul de metileno. Dejamos actuar un minuto y lavamos con solución tampón pH 7.2 dejamos escurrir y secar en posición vertical.

3. Inmediatamente antes de su empleo y en un tubi de ensayo, diluimos 0,5 ml de solución tampón pH 7,2. mezclamos bien y cubrimos con esta dilución la extensión. Teñimos durante 3-5 minutos y lavamos con agua, escurrimos y secamos en posición vertical.

• Descripción y registro de resultados.

Depositamos una gota de aceite de inmersión y observamos con el objetivo de 100x. Las células se observan coloreadas de la misma manera que con la tinción de Giemsa. En conclusión obtenemos una tinción que es capaz de diferenciar las distintas estructuras que conforman las células.

Actividades.

¿ Qué tipo de colorante utilizamos?

Solución de Eosina, azul de metileno y azur B.

¿ Qué sustancia empleamos como fijador?Ninguna.

¿ Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido?

De 3 a 5 minutos.