Tinción supravital con azul de metileno. 6/11/14

En esta tinción utilizamos como colorante el azul de metileno nuevo. Este es de carácter básico y tiñe fundamentalmente los núcleos celulares.

• Muestra utilizada.

Sangre capilar o sangre venosa anticoagulada.

• Reactivo utilizado.

Azul de metileno

• Material utilizado.

• Microscopio óptico.
• Portas y cubres.
• Alcohol y algodón.
• Lancetas.
• Tubos de hemolisis.
• Pipetas pasteur.
• Vaselina.
• Papel parafilm.

• Secuenciación y procedimiento.

1. Una vez preparados todos los materiales cogemos el algodón y humedecemos el dedo y realizamos la punción.
2. Recogemos dos gotas de sangre con ayuda del capilar y posteriormente las depositamos en el tubo de hemolisis e inmediatamente echamos dos gotas de reactivo de azul de metileno y tapamos con el papel parafilm.
3. Al cavo de tres minutos aspirar dos gotas de mezcla en reposo y las depositamos sobre el portaobjetos.
4. Cubrimos la mezcla con un cubreobjetos y, si es preciso sellamos los bordes del cubreobjetos con vaselina.
5. Observamos la preparación resultante al microscopio óptico con el objetivo de 40x.

La observación óptica ha de ser rápida, ya que las células no permanecen vivas mucho tiempo. Podemos apreciar los núcleos celulares en comparación con la preparación obtenida en la práctica anterior.

• Descripción y registro de resultados.

La observación microscópica ha de ser rápida ya que las células no permanecen vivas mucho tiempo. Podemos apreciar los núcleos celulares en comparación con la preparación obtenida en la práctica anterior.

Actividades

1. ¿ En que se diferencia una tinción vital de una supravital?
   Las tinciones supravitales son aquellas que se realizan sobre tejidos o células vivas, pero que están aislados del organismo del que procede, mientras que las tinciones vitales las células y tejidos están en el organismo del que proceden.

2. ¿ Cuales son los colorantes vitales mas utilizados?
   Los colorantes mas utilizados son el rojo neutro, que tiñe fundamentalmente los gránulos citoplasmáticos, el verde jano, que tiñe mitocondrias y otros orgánulos celulares, y el azul de metileno, que tiñe núcleos y algunas estructuras celulares.

3. ¿ Qué tipos de estructuras tiñe selectivamente el verde Jano?
   El verde Jano, tiñe mitocondrias y otros orgánulos celulares.

4. ¿Cuales son las ventajas de una tinción suprevital?
   La ventaja de una tinción supravital es que te permite relevar donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos.

5. ¿Cuáles son los inconvenientes?
   Afectan a la viabilidad de los organismos.