DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE PROTOMBINA
(TP)
INTRODUCCIÓN
El tiempo de protombina (TP) es el
tiempo que tarda en coagular un PPP, cuando se pone en contacto con
un exceso de calcio y de tromboplastina hística.
Fundamento
El reactivo utilizado para la
realización de esta prueba es una mezcla de tromboplastina hística
(TH) y de calcio, por lo que recibe el nombre de tromboplastina
cálcica.
La TH procede de extractos de cerebro o
de pulmón, de hombre o de animales (generalmente, de conejo o de
vaca).
Material necesario
- Una gradilla
- Una cubeta de coagulómetro.
- Un trocito de acero especial para depositar en el interior de la cubeta.
- Un rotulado de vidrio de punta fina.
- Una pipeta automática capaz de dispensar 100 y 200 µl.
- 2 puntas de pipeta automática adecuadas para contener 100 y 200 µl ( las de color amarillo).
- Un coagulómetro.
- Un baño de agua ajustable a 37°C.
- 2 tubos de ensayo de plástico.
Reactivos
- Una tromboplastina cálcica (por ejemplo, reactivo Thromboplastina-D preparado por los Laboratorios Pacific Hemostasis y distribuido por la Casa comercial RAL).
La sensibilidad de
todas las TH comerciales se compara con la de una TH de referencia
internacional. Esta comparación se expresa en forma de un Índice de
Sensibilidad Internacional (ISI). Cuando menor es el ISI de la TH
comercial, mayor es su sensibilidad.
El ISI de cada
reactivo de tromboplastina cálcica comercial puede ser diferente y,
además, puede variar de un lote a otro. Por lo que debe mirarse en
el folleto de instrucciones que se adjuntan a cada envase.
Muestra
- Un plasma pobre en plaquetas (PPP), correctamente preparado.
Técnica
- Homogeneizar la tromboplastina cálcica, sin agitarla bruscamente.
- Depositar el volumen total de tromboplastina cálcica que se va a necesitar, en un tubo de ensayo de plástico, adecuadamente rotulado.
- Atemperar la tromboplastina cálcica, a 37°C. Para ello, se sitúa el tubo que contiene esta sustancia en un baño de agua, ajustado a 37°C, entre 5 y 15 minutos.
- Introducir un trocito de acero apropiado en una cubeta de coagulómetro.
- Rotular el extremo superior de la cubeta con la letra M ( de Muestra).
- Verter 100 µl del PPP problema en el interior de la cubeta.
- Incubar el PPP, contenido en esa cubeta, a 37°C, entre 3 y 5 minutos. Para ello, puede depositarse la cubeta en la placa calefactora del coagulómetro.
Colocar la cubeta en la celda de
medida del coagulómetro, y agregar 200 µl de tromboplastina
cálcica.
Al agregar la tromboplastina cálcica,
se pone en marcha el magnetoagitador del coagulómetro y comienza la
lectura de éste.
Cuando se forma el coágulo, el
coagulómetro finaliza la lectura y nos ofrece en su pantalla el
tiempo transcurrido desde la adición de la tromboplastina cálcica.
Lectura de los resultados
El TP es el tiempo trascurrido desde
la adición de la tromboplastina cálcica hasta la formación del
coágulo de fibrina.
Lo más correcto es determinar 2 veces
el TP de la muestra y dar, como resultado final, la cifra media
calculada a partir de cada par de valores.
El resultado también puede expresarse
en forma de porcentaje de actividad de la protrombina. Para ello, el
valor en segundos del TP determinado en la muestra se interpola en la
curva de actividad de la protombina, previamente preparada, y se
halla el porcentaje de actividad de la protrombina que le corresponde
a éste.
Además, el resultado puede expresar en
forma de cociente o proporción (ratio) entre el valor, en segundos,
del TP de la muestra y el de un plasma control normal no diluido (el
de 100% de actividad).
Este cociente puede ser corregido con
el ISI de la tromboplastina hística, en este caso se denomina INR y
se calcula con la siguiente fórmula:
INR = ( TP del plasma del paciente / TP
de un plasma control normal) ISI
Los valores del TP están comprendidos,
normalmente, entre los 11 y los 15 segundos.
El porcentaje de actividad de la
protrombina de un plasma normal oscila, habitualmente, entre el 70 y
el 100%.
La ratio de protrombina normal está
comprendida entre 0,9 y 1,15.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS
RESULTADOS OBTENIDOS
El tiempo de protrombina está
alargado, el porcentaje de actividad de la protrombina está
disminuido y la ratio de protrombina está aumentada, en pacientes
con déficits de factores de la vía extrínseca, en enfermos
sometidos a terapias con dicumarinas y en pacientes que sufren
algunos trastornos hepáticos.
ACTIVIDADES.
1º¿Qué índice expresa la sensibilidad de una tromboplastina hística ? (ISI) Índice de Sensibilidad Internacional.
2º¿Cómo se llama la ratio de protrombina corregida ?(INR) Razon Normalizado Internacional.
3º ¿Cuál es el % normal de actividad de la protrombina ? entre 70 y 100 %
4º¿E n qué circunstancias se altera el TP ?en déficts de factores de la vía extrínseaca,en enfermos sometidos a terapias con dicumarinas y en personas que sufren transtornso hépaticos
Resultados obtenidos
- TP de la muestra en segundos :37,2 seg.
- % de la actividad de la protrombina contenida en la muestra,obtenido mediante interpolación en la curva de actividad preparada previamente :
- TP del plasma control normal no diluido (el de 100% de actividad): 12,3
- Ratio entre el TP de la muestra y el TP del control : 1,32
- ISI de la tromboplastina hística utilizada : 1,24( de la casa comercial ).
Valoración de los resultados
La muestra ensayada tiene un TP:
Alargado
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